Bağlama (Biyoloji)

Kısaca: Bağlama veya ligasyon, rekombinant DNA teknolojisinde klonlanacak geni taşıyan DNA parçaları ile vektörün bir enzim aracığılıyla birbirlerine bağlanması işlemine denir. Bu işlem için ligaz cinsi enzimler görev yapar. ...devamı ☟

Bağlama (biyoloji)
Bağlama (biyoloji)

Bağlama veya ligasyon, rekombinant DNA teknolojisinde klonlanacak geni taşıyan DNA parçaları ile vektörün bir enzim aracığılıyla birbirlerine bağlanması işlemine denir. Bu işlem için ligaz cinsi enzimler görev yapar. Bağlamadaki sorunlardan biri vektörün yabancı DNA'ya bağlanması yerine kendi uçlarının birleşip halka şeklini kazanmasıdır, bunu engellemek için yapılan uygulamalardan biri, vektörün 5' uçlarındaki fosfat gruplarının yokedilerek fosfodiester bağ oluşumunu önlemektir. Bağlama için uygun uçların bulunması ya da oluşturulması gerekir. Değişik yöntemlerle bu gerçekleştirilebilir: * Kesme enzimleri tarafından meydana getirilen yapışkan uçların birbirini tanıması şeklinde bağlanma Aynı cins enzimle kesilmiş DNA parçaları ve doğrusal konuma getirilmiş taşıyıcı DNA molekülleri biraraya getirildiğinde, farklı kökenlere sahip olsalar bile, birbirlerini tamamlayıcı özellikteki (yapışkan) uçları taşımalarından dolayı uçlar arasındaki baz eşleşmeleriyle moleküller bağlanır. Sonrasında ligaz enzimi nükleotidler arasında fosfodiester bağları kurarak açık uçları kapatır. Bu yöntem rDNA elde etmek için kullanılan en basit ve etkili yoldur. Ligaz yüksek yoğunlukta kullanılırsa rekombinant oranı artarken, düşük yoğunlukta kullanıldığında DNA parçaları halka şeklini alırlar. * Bağlayıcı ya da aracı moleküller kullanarak bağlanma Bu yöntem küt olan uçların bağlanmasında kullanılır. Aracı olarak yapay bağlayıcı moleküller kullanılmaktadır. Bu sentetik aracı moleküller 6-10 baz çiftinden oluşan oligonükleotidlerdir. Bu moleküller 5' uçları polinükleotid kinaz ile fosforlanma sonrası T4 DNA ligaz yardımıyla küt uçlu parçalara bağlanır ve bir kesme enzimi yardımıyla yapışkan uçlar oluşturulur. Bu şekilde oluşturulmuş diğer bir taşıyıcıya bağlanma ve aralıkların ligazla kapatılmasıyla bağlanma işlemi tamamlanır. * Homopolimerik tek zincirli kuyruklar kullanarak bağlanma Bu yöntemle de küt uçların bağlanması sağlanmaktadır. Küt uçların 3' uçlarında terminal transferaz enzimi yardımıyla homopolimerik tek zincirli kuyruklar takılır. Bu yöntem özellikle ökaryotik genlerin çoğaltılmasında kullanılmaktadır. Ökaryotik cDNA parçalarının taşıyıcılara bağlanmasında kuyruklama yöntemi başarılı sonuçlar vermektedir. Ayrıca bakınız * Rekombinant DNA teknolojisi * Ligaz * Genetik Mühendisliği, Prof. Dr. Güler TEMİZKAN Dış bağlantılar * Rekombinant DNA animasyonu * BBSRC - Genetik modifikasyonun arkasındaki bilim - (İngilizce)

Kaynaklar

Vikipedi

Bu konuda henüz görüş yok.
Görüş/mesaj gerekli.
Markdown kullanılabilir.

Bağlama (biyoloji) Resimleri

Bağlama (anlam ayrımı)
6 yıl önce

vb) Ulama. (Fr. Liaison) Bağlama (mühendislik): İki dingilin veya borunun uçlarından birleştirilmesi. Kuplaj. Bağlama (biyoloji): Rekombinant DNA teknolojisinde...

Yapısal biyoloji
3 yıl önce

Yapısal biyoloji, biyolojinin özellikle amino asitlerden yapılmış olan proteinler, nükleotitlerden yapılmış RNA ve DNA gibi nükleik asitler ve lipitlerden...

Biyomühendislik
3 yıl önce

Biyomühendislik, biyoloji, moleküler biyoloji, biyokimya, mikrobiyoloji, hücre metabolizması ile, temel mühendislik ve malzeme bilimlerindeki hızlı ilerlemeler...

Biyomühendislik, Biyoloji, Mühendislik
Yelkovangiller
6 yıl önce

(Puffinus) Thalassoica ^ "Biyoloji Terimleri Sözlüğü". TDK. Erişim tarihi: 3 Ağustos 2009. [ölü/kırık bağlantı] ^ "Biyoloji Terimleri Sözlüğü". TDK. Erişim...

Yelkovangiller, Taksokutu, Animalia, Aves, Bilimsel sınıflandırma, Chordata, Familya, Fulmarus, Procellariiformes, Takım, Tüp burunlu kuşlar
Klonlama
3 yıl önce

yapısı birbirinin tıpatıp aynı olan canlı topluluğuna karşılık gelen bir biyoloji terimidir ve kısaca "cl." simgesiyle gösterilir. Klonlama temelde üç ana...

Klonlama, Antikor, Bakteri, Fare, Genetik, Genom, Kedi, Keçi, Klonal çoğalma, Koyun, Kurbağa
Prematüre
7 yıl önce

Prematüre (İng. olgunlaşmamış) Türkçede özellikle biyoloji ve tıp alanında şu bağlamda terim olarak kullanılmaktadır: Normal koşullarda doğum 38 ile 42...

Prematüre, Erken doğum, Prematüre ventriküler kontraksiyon, Premature menopause, Prematüre ejakülasyon, Anlam ayrım
Sevgi çiçeği
3 yıl önce

Prof. Dr. Mecit Vural, Gazi Üniversitesi, Biyoloji Bölümü. Yanardöner Hatıra Parası (Türkiye'nin Çiçekleri Serisi) Fotoğraf Galerisi[ölü/kırık bağlantı]...

Sevgi çiçeği, Afyon, Afyonkarahisar, Ankara, Asteraceae, Asterales, Bilimsel sınıflandırma, Binominal nomenklatür, Gölbaşı, Linnaeus, Magnoliophyta
PubMed
3 yıl önce

bir biyomedikal veritabanı. Sitede yer alan başvuru kitapları moleküler biyoloji, genetik ve tıp bilimleriyle ilgili konulara ışık tutmaktadır. Sağlık bilimleri...

PubMed, Tıp